根据R基因保守区分离小麦R基因类似序列

根据R基因保守区分离小麦R基因类似序列

用根据核苷酸结合位点(nucleotide binding site, NBS)和丝氨酸/苏氨酸蛋白质激酶域设计的2对简并性引物,以小麦-簇毛麦6VS/6AL易位系的cDNA为模板进行PCR扩增.扩增产物克隆到pGEM-T载体中,经测序,共获得具有NBS结构域特征的片段克隆9个和具有丝氨酸/苏氨酸蛋白质激酶域特征的片段的克隆1个.将克隆之间核苷酸序列同源性高于90%的克隆归为一类,把9个NBS片段分为6类.这6类抗病基因类似序列(resistance gene analogs, RGA)均具有阅读框,并与已克隆的小麦抗条锈病基因Yr10、大麦抗白粉病基因Mla1和Mla6、拟南芥的抗病基因RPS2以及其他一些抗病基因在NBS保守区内具有高度的同源性.用小麦中国春缺体-四体初步将它们分别定位于小麦第一、第二和第五部分同源群上.进一步用5′-RACE技术获得RGA N5的5′-端,发现其编码产物的N端还具有6个亮氨酸拉链(leucine zipper, LZ),与RPS2的N-端有较高同源性.

作 者： 秦跟基 陈佩度 顾红雅 冯袆高 牛吉山 QIN Gen-Ji CHEN Pei-du GU Hong-Ya FENG Yi-Gao NIU Ji-Shan 作者单位： 秦跟基,QIN Gen-Ji(南京农业大学农业部作物细胞遗传重点实验室,南京,210095;北京大学生命科学学院,蛋白质工程及基因工程国家重点实验室,北京,100871)

陈佩度,冯袆高,牛吉山,CHEN Pei-du,FENG Yi-Gao,NIU Ji-Shan

(南京农业大学农业部作物细胞遗传重点实验室,南京,210095)

顾红雅,GU Hong-Ya(北京大学生命科学学院,蛋白质工程及基因工程国家重点实验室,北京,100871)

刊 名： 植物学报 ISTIC SCI 英文刊名： ACTA BOTANICA SINICA 年，卷(期)： 200345(3) 分类号： Q943.2 关键词： R基因类似片段 核苷酸结合位点 PCR 小麦-簇毛麦6VS/6AL易位系 resistance gene analogs nucleotide-binding site PCR Triticum aestivum-Haynaldia villosa translocation line