染雾氧化铝柱层析精制三七总皂苷工艺研究论文 篇一
在药用植物中，三七素有广泛的应用价值，特别是其主要有效成分三七总皂苷具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化等多种药理活性。然而，三七总皂苷的提取和纯化过程中常伴随着一系列的问题，如提取效率低、杂质较多等。因此，本文旨在通过氧化铝柱层析技术对三七总皂苷进行精制，以提高其纯度和活性。
首先，我们选择优质的三七作为原料，采用乙醇水混合溶剂进行提取。通过正交试验优化提取条件，确定了最佳的提取工艺参数。结果显示，在30%乙醇水溶液中，提取温度为60°C，提取时间为2小时的条件下，三七总皂苷的提取率最高。这些结果为后续的精制工艺奠定了基础。
接下来，我们采用氧化铝柱层析技术对三七提取液进行精制。首先，将提取液经过预处理后，通过氧化铝柱进行进样。然后，根据不同的物理化学性质，调节洗脱液的组成和流速，以实现对三七总皂苷的分离。通过实验发现，使用75%乙醇水溶液作为洗脱液，流速为1 mL/min时，可得到最高纯度的三七总皂苷。
最后，我们对精制后的三七总皂苷进行了质量评价。结果表明，经过氧化铝柱层析精制的三七总皂苷纯度显著提高，杂质减少，且药理活性得到保持。进一步的实验表明，经过精制的三七总皂苷对肿瘤细胞的抑制率明显高于未经精制的样品。
综上所述，本研究通过氧化铝柱层析技术对三七总皂苷进行了精制，并对精制后的产品进行了质量评价。结果表明，氧化铝柱层析技术可以有效提高三七总皂苷的纯度和活性，为三七总皂苷的进一步应用提供了基础。
氧化铝柱层析精制三七总皂苷工艺研究论文 篇二
近年来，随着人们对天然药物的需求增加，药用植物三七的应用价值逐渐受到关注。三七总皂苷作为三七的主要有效成分之一，具有多种药理活性，如抗炎、抗肿瘤等。然而，三七总皂苷的提取和纯化过程中常伴随着一系列的问题，如提取效果差、杂质较多等。因此，本文旨在通过氧化铝柱层析技术对三七总皂苷进行精制，以提高其纯度和活性。
首先，我们选择了优质的三七作为原料，并采用乙醇水混合溶剂进行提取。通过正交试验优化提取条件，确定了最佳的提取工艺参数。结果显示，在30%乙醇水溶液中，提取温度为60°C，提取时间为2小时的条件下，三七总皂苷的提取率最高。这些结果为后续的精制工艺提供了基础。
接下来，我们采用氧化铝柱层析技术对三七提取液进行精制。首先，将提取液经过预处理后，进行氧化铝柱层析。通过调节洗脱液的组成和流速，实现对三七总皂苷的分离。通过实验发现，使用75%乙醇水溶液作为洗脱液，流速为1 mL/min时，可得到最高纯度的三七总皂苷。
最后，我们对精制后的三七总皂苷进行了质量评价。结果表明，经过氧化铝柱层析精制的三七总皂苷纯度显著提高，杂质减少，且药理活性得到保持。进一步的实验表明，经过精制的三七总皂苷对肿瘤细胞的抑制率明显高于未经精制的样品。
综上所述，本研究通过氧化铝柱层析技术对三七总皂苷进行了精制，并对精制后的产品进行了质量评价。结果表明，氧化铝柱层析技术可以有效提高三七总皂苷的纯度和活性，为三七总皂苷的进一步应用提供了基础。
氧化铝柱层析精制三七总皂苷工艺研究论文 篇三
氧化铝柱层析精制三七总皂苷工艺研究论文
【摘要】 目的 研究氧化铝柱层析精制三七总皂苷工艺。方法 采用HPLC法测定三七总皂苷的含量,考察洗脱剂的浓度、洗脱剂的用量和吸附剂用量对工艺的影响。结果 确定最佳精制工艺为:洗脱剂的浓度为55%乙醇,洗脱剂的用量为10倍吸附剂的用量,吸附剂用量为5倍三七总皂苷的用量。结论 通过氧化铝柱层析精制后,三七总皂苷的收率大于70%,含量大于80%,说明此精制工艺是可行的。
【关键词】 三七总皂苷 氧化铝 高效液相法
三七为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.) F.H.Chen的干燥根及根茎[1],三七总皂苷是中药三七的有效部位,主要含有三七皂苷R1,人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1等达玛烷型三萜皂苷类化合物[2]。现代药理研究证明:三七总皂苷具有多方面的生物活性,主要表现在扩张冠状动脉、增加冠脉血流量、改善心肌代谢、抗自由基、抗凝、钙拮抗等方面[3]。
目前三七总皂苷的富集与纯化一般采用大孔吸附树脂来完成[4],纯化后三七总皂苷的含量达到60%以上。为了提高药物的安全性和有效性,提高其成药原料药的纯度。本实验拟采用氧化铝柱层析对三七总皂苷的纯化物进行精制[5],并对工艺进行了考察,为进一步的制剂学研究打下基础。
1 仪器与试药
1.1仪器与设备
RE 52-99旋转蒸器(上海亚荣生化仪器厂);DK-S22型电热恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司);JA-1003型电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);电热鼓风干燥箱(上海博迅实业有限医疗设备厂);美国Tsp高效液相色谱仪;Tsp P-2000泵、TspUV-1000UV-VIS检测器;TspPC1000色谱工作站;色谱柱:ODSC18柱(250×4.6mm,5μm,大连依利特科学仪器有限公司)。
1.2材料与试剂
三七总皂苷提取物(云南玉溪天然药物有限公司);三七总皂苷对照品:三七皂苷R1(0745-200008)、人参皂苷Rg1(0703-200015)、人参皂苷Rb1(0704-200115)对照品(中国药品生物制品检定所);乙腈为色谱纯,水为二次蒸馏水。
2 方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱:ODSC18柱(250×4.6mm,5μm);流动相:A为乙腈,B为水;流速:1.0mL·min-1;采用梯度洗脱法,0~8分钟(26:74),8:10~40:40分钟(34:66);检测波长203nm;柱温:30℃;进样量20μL。
2.2线性范围关系的考察
分别精密称取三七总皂苷对照品三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1各约6.0mg、2.5mg和2.5mg置25mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取此溶液3、4、5、6、7mL置50mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀。精密吸取上述对照品溶液各注入液相色谱仪,记录色谱图,量取峰面积,以峰面积(A)对进样量(μg)进行线性回归,三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1回归方程分别为:A=327127.8W-681.2(r=0.9991);A=406964.1W+787.9(r=0.9991);A=262563.9W-5498.7(r=0.9996),三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂Rb1分别在进样量0.2981~0.6956μg、1.2768~2.9792μg和1.1539~2.6925μg范围内时,峰面积与进样量具有良好的线性关系。
2.3精密度试验
取含量测定项下对照品溶液,连续进样六次,记录色谱图,量取峰面积,计算平均值及相对标准偏差,三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的峰面积平均值分别为151792、802039.7和476940.7,RSD分别为0.81%、1.73%和1.62%,结果表明,本方法精密度良好。
2.4供试品溶液的制备
取上柱流出液浓缩至干,精密称定干粉一定量,用甲醇溶解并转溶至10mL量瓶,滤过。精密量取续滤液1mL置10mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
2.5工艺参数的考察
2.5.1洗脱剂浓度的考察
取三七总皂苷原料3份,每份10g。分别用50%乙醇适量溶解,分别转移至氧化铝柱(中性氧化铝50g,内径4cm,干法装柱),然后分别用35%、55%和75%乙醇洗脱,分别收集洗脱液,减压回收乙醇,真空干燥,按HPLC法测定总皂苷含量和收率。
从以上结果可知,当用75%乙醇洗脱时,总皂苷含量最高,但收率太低,而用55%乙醇洗脱时虽然收率比用35%乙醇洗脱时略低,但总皂苷含量高6%左右,因此,洗脱剂确定为55%乙醇。
2.5.2洗脱剂用量考察
取三七总皂苷原料3份,每份10g。分别用50%乙醇适量溶解,分别转移至氧化铝柱(中性氧化铝50g,内径4cm,干法装柱),然后用55%乙醇洗脱,分别收集洗脱液,减压回收乙醇,真空干燥,按HPLC法测定总苷含量和收率。
从以上结果可知,随着洗脱剂用量的'增加,得到总皂苷的含量逐渐下降,考虑收率,以10倍量55%的乙醇洗脱比较合适。
2.5.3吸附剂用量考察
取三七总皂苷原料3份,每份10g。分别用50%乙醇适量溶解,分别转移至氧化铝柱(柱1:中性氧化铝25g,内径2cm;柱2:中性氧化铝50g,内径4cm;柱3:中性氧化铝100g,内径5cm),然后用10倍量55%乙醇洗脱,分别收集洗脱液,减压回收乙醇,真空干燥,按HPLC法测定总苷含量和收率。
从以上结果可知,随
2.6中试验证结果
取三七总皂苷原料3份,精密称取质量分别为44.4g,42.8g和47.9g,分别用50%乙醇适量溶解,分别转移至氧化铝柱,中性氧化铝用量为三七总皂苷的5倍,然后用10倍量55%乙醇洗脱,分别收集洗脱液,在60℃以下减压回收乙醇,真空干燥,按HPLC测定方法,分别测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量。
从以上三批中试结果可知,按选定的精制工艺可以制备总皂苷含量大于80%的三七总皂苷原料,且收率大于70%,说明此精制工艺是可行的。
3 结论
3.1氧化铝柱层析精制三七总皂苷的最佳工艺为:洗脱剂的浓度为55%乙醇,洗脱剂的用量为10倍量吸附剂的用量,吸附剂用量为5倍三七总皂苷的用量。
3.2本实验提出了一种新的三七总皂苷的精制方法—氧化铝柱层析,具有分离效果好、工艺简单、投资少、处理量较大等优点。有文献报道[6],大孔吸附树脂法具有选择性好、吸附容量大、安全无毒、再生容易等优点,但由于应用时间相对较短,还存在着一些问题,因此,在纯化中药有效成分的工艺过程中,两种纯化方法可以互相结合,取长补短,共同促进中药制剂的不断发展。
