基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的探讨(通用3篇)

时间:2015-05-06 08:22:19
染雾
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基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的探讨 篇一

在植物基因组研究中,提取纯净的DNA是十分重要的一步。而CTAB法是一种常用的提取DNA的方法,被广泛应用于植物基因组研究中。本文将探讨基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的方法及其效果。

首先,我们需要准备样品。选择新鲜的毛竹叶片作为样品,将其快速冷冻在液氮中,然后将样品转移到低温条件下保存。在提取DNA之前,需要将样品研磨成细粉末,以增加DNA的释放效果。

接下来,我们需要准备提取液。CTAB法的提取液主要包括CTAB缓冲液、蛋白酶K、RNase A等。CTAB缓冲液的成分包括CTAB、Tris-HCl、EDTA等,其作用是破坏细胞膜、溶解蛋白质和DNA的膜结合蛋白。蛋白酶K的作用是降解蛋白质,以去除DNA中的蛋白质污染。RNase A的作用是降解RNA,以去除DNA中的RNA污染。

在提取过程中,首先将样品加入提取液中,然后进行温育和离心等步骤。温育是将样品和提取液在高温条件下反应一段时间,以促进细胞的破裂和DNA的释放。离心是将混合液进行离心分离,以分离DNA沉淀和其他杂质。

最后,我们需要进行DNA的纯化和检测。纯化的方法可以选择酚/氯仿提取法、硅胶柱纯化法等。检测DNA的方法可以选择琼脂糖凝胶电泳等。通过琼脂糖凝胶电泳,可以观察到DNA的大小和纯度,判断提取的DNA是否完整。

通过以上步骤,我们成功地利用CTAB法提取了毛竹基因组DNA。提取的DNA经过琼脂糖凝胶电泳检测,呈现出明亮的DNA条带,且大小均一,表明提取的DNA较纯净。这为后续的基因组研究提供了可靠的材料基础。

综上所述,基于CTAB法提取毛竹基因组DNA是一种可行且有效的方法。通过该方法提取的DNA可以用于进一步的基因组研究,如PCR扩增、基因测序等。这将为毛竹的遗传改良和种质资源保护提供重要的技术支持。

基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的探讨 篇二

在植物基因组研究中,提取高质量的DNA是十分重要的一步。CTAB法被广泛应用于植物基因组DNA的提取,其优点是提取得到的DNA质量好、纯度高。本文将探讨基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的优势和改进方法。

首先,CTAB法的优势在于其提取得到的DNA质量好、纯度高。CTAB通过破坏细胞膜和溶解蛋白质,使DNA从细胞中释放出来。同时,蛋白酶K的加入能够去除DNA中的蛋白质污染。这样提取得到的DNA具有较高的纯度,能够满足后续基因组研究的需要。

其次,CTAB法的提取步骤相对简单,操作方便。相比其他DNA提取方法,CTAB法不需要使用有机溶剂,减少了实验中的有机溶剂的使用量,同时也减少了对环境的污染。此外,CTAB法的提取步骤相对较少,减少了实验中的操作时间,提高了工作效率。

然而,CTAB法在提取毛竹基因组DNA时也存在一些问题。首先,毛竹叶片中含有丰富的多酚类物质,这些物质会与DNA结合,影响DNA的纯度。此外,毛竹叶片中的纤维素含量较高,这些纤维素会形成凝胶状物质,影响DNA的提取和纯化。

为了解决以上问题,可以在CTAB提取液中加入一定浓度的抗氧化剂和螯合剂,如PVP和β-巯基乙醇。抗氧化剂能够防止多酚类物质氧化,保护DNA的完整性。螯合剂能够与多酚类物质形成络合物,减少其对DNA的影响。此外,还可以在提取液中加入纤维素酶,以降解纤维素,提高DNA的提取效果。

通过以上改进方法,我们可以提高基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的效果。提取得到的DNA质量更好、纯度更高,为后续基因组研究提供了更可靠的材料基础。

综上所述,基于CTAB法提取毛竹基因组DNA是一种可行且有效的方法。通过改进提取方法,可以进一步提高DNA的纯度和质量,为毛竹的基因组研究提供更好的支持。

基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的探讨 篇三

基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的探讨

应用CTAB法、改良CTAB法、改良CTAB-高盐沉淀法对毛竹基因组DNA进行了提取,并用紫外分光光度计(UV3300)、琼脂糖凝胶电泳和PCR分析对提取的DNA进行了检测,对DNA的产量、质量、PCR效果等方面进行了综合比较.结果表明:改良CTAB-高盐沉淀法是提取高质量毛竹基因组DNA的较好方法.

作 者:高志民 范少辉 高健 李雪平 蔡春菊 彭镇华 GAO Zhi-min FAN Shao-hui GAO jian LI Xue-ping CAI Chun-ju PENG Zhen-hua 作者单位:高志民,范少辉,高健,李雪平,蔡春菊,GAO Zhi-min,FAN Shao-hui,GAO j

ian,LI Xue-ping,CAI Chun-ju(国际竹藤网络中心,国家林业局竹藤科学与技术重点开放实验室,北京,100102)

彭镇华,PENG Zhen-hua(中国林业科学研究院林业研究所,北京,100091)

刊 名:林业科学研究 ISTIC PKU 英文刊名: FOREST RESEARCH 年,卷(期): 200619(6) 分类号: S795 关键词:毛竹 基因组DNA CTAB法
基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的探讨(通用3篇)

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