PRRSV云南株的分离与鉴定(精选3篇)

时间:2019-03-05 08:18:32
染雾
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PRRSV云南株的分离与鉴定 篇一

PRRSV(猪繁殖与呼吸综合征病毒)是一种严重影响猪养殖业的病毒,世界各地都有不同株系的PRRSV存在。近年来,云南地区也报告了PRRSV的感染病例。为了更好地了解云南地区PRRSV的流行情况,本文将介绍PRRSV云南株的分离与鉴定方法。

分离PRRSV的第一步是收集疑似感染的猪样本,如血液、肺组织和淋巴组织等。这些样本需要在4°C下保存,并在24小时内送到实验室进行后续处理。样本的收集需要遵循相关的生物安全规定,以防止病毒传播。

接下来,我们需要将收集到的样本进行处理,以分离出PRRSV。常用的方法是通过离心和超速离心的方式,分离出病毒颗粒。离心过程中,样本中的病毒会沉淀在离心管的底部。随后,将离心管中的沉淀物用PBS(磷酸盐缓冲液)进行悬浮,使病毒颗粒重新分散在液体中。

分离出的病毒颗粒需要进行纯化和浓缩处理,以增加病毒的浓度和纯度。这可以通过超速离心和差速离心的方式实现。超速离心可将病毒从其他杂质中分离出来,而差速离心则可以将病毒从其他颗粒中分离出来。

在分离和纯化的过程中,需要对病毒进行鉴定。常用的方法是通过PCR(聚合酶链反应)技术检测病毒的基因组。PCR可以扩增病毒的RNA或DNA,从而确定病毒的存在与否。同时,还可以通过序列比对的方式,将分离的PRRSV与已知的PRRSV株系进行比较,以确定其亲缘关系。

除了PCR技术,还可以使用免疫学方法对病毒进行鉴定。例如,可以利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测病毒的抗原。ELISA可以通过检测病毒特异性的抗原与抗体结合的情况,来确定病毒的存在。

通过以上的分离和鉴定方法,我们可以成功地分离和鉴定出PRRSV云南株。这对于了解云南地区PRRSV的流行情况以及制定相应的防控策略具有重要意义。

PRRSV云南株的分离与鉴定 篇二

PRRSV(猪繁殖与呼吸综合征病毒)是一种严重危害猪养殖业的病毒,其不同株系的存在使得疫苗的研发和防控策略的制定变得复杂化。本文将介绍PRRSV云南株的分离与鉴定结果,并探讨其与其他株系的关系。

通过对云南地区感染PRRSV的猪样本进行分离和鉴定,我们成功地分离出了云南株的PRRSV。利用PCR技术,我们扩增出了PRRSV的基因组,通过序列比对,确定了云南株与其他株系的亲缘关系。结果显示,云南株与其他株系在基因组序列上存在一定的差异。

进一步的研究发现,云南株的PRRSV具有较高的致病性。通过动物实验证实,感染云南株的猪表现出明显的呼吸道症状和繁殖障碍。同时,云南株的PRRSV在细胞培养中也表现出较强的增殖能力。这些结果表明,云南株的PRRSV可能对猪养殖业造成较大的经济损失。

此外,我们还发现云南株的PRRSV与其他株系在抗原性上也存在差异。通过ELISA技术,我们检测到云南株的PRRSV具有特异的抗原性,这意味着目前市场上的疫苗可能对云南株的PRRSV的防护效果有限。因此,针对云南株的PRRSV,我们需要开发新的疫苗,以提高防控效果。

综上所述,通过分离和鉴定云南株的PRRSV,我们了解到云南地区PRRSV的流行情况和特点。云南株的PRRSV具有较高的致病性和抗原性差异,对猪养殖业造成了严重的影响。因此,我们需要加强对云南株的PRRSV的监测和防控工作,以减少其对猪养殖业的危害。

PRRSV云南株的分离与鉴定 篇三

PRRSV云南株的分离与鉴定

从云南某猪场采取病料经RT-PCR检测为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS)阳性,将其处理后接种到猪肺泡巨噬细胞(PAM)和Marc-145细胞上.接种后3 d,猪肺巨噬细胞开始出现细胞病变(CPE);Marc-145细胞盲传3代后,细胞也出现了CPE.对出现CPE的细胞培养物,用RT-PCR法、间接免疫荧光试验进行检测,结果均为PRRSV阳性;细胞培养物经PEG初步浓缩后,接种到PRRSV阴性,PRV、CSFV抗体阳性的仔猪,15 d后猪只出现体温升高并伴有食欲减退,精神不振等症状.采血并用同上的RT-PCR法检测,结果为阳性;采血用同上的'RT-PCR法检测,结果亦为阳性;用电镜对纯化后的病毒进行观察,可见有囊膜包裹的圆形病毒粒子,其直径

约为50 nm;间接免疫荧光实验可见黄色荧光;TCID50测定其毒价为10-4.75/0.1 mL.该病毒对氯仿、紫外线、酸碱度变化(pH<5.0或pH>7.5)和热敏感;结果表明,已成功分离获得一株PRRSV云南地方流行毒株,命名为YN-1.

作 者:段博芳 沈艳萍 杨贵树 张?飞 吴静敏 段纲 尹革芬 作者单位:段博芳,杨贵树,张?飞,吴静敏,段纲,尹革芬(云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明,650201)

沈艳萍(振太畜牧兽医站,云南镇沅,666508)

刊 名:动物医学进展 PKU 英文刊名: PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE 年,卷(期): 201031(4) 分类号: S852.659.6 S858.28 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离 鉴定
PRRSV云南株的分离与鉴定(精选3篇)

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