染雾植物组织培养 篇一
植物组织培养是一种通过离体培养植物组织或细胞来繁殖植物的技术。这种技术的出现使得科研人员能够在实验室中控制植物的生长和发育过程，为植物育种和生物学研究提供了重要手段。
植物组织培养的基本步骤包括组织的培养、分化和再生。首先，需要从植物体中取下一小块组织，如茎尖、叶片或种子，然后将其置于含有营养物质和植物激素的培养基上，使其在无菌条件下生长。培养基中的植物激素可以促使组织细胞分裂、扩散和分化，最终形成新的植物体。
通过植物组织培养，科研人员可以实现无性繁殖和遗传改良。例如，可以通过组织培养快速繁殖优质植物种子，或者通过基因转化技术向植物细胞中导入外源基因，实现植物的遗传改良。此外，植物组织培养还可以用于研究植物的生长发育机制、抗逆性和代谢途径等方面。
然而，植物组织培养也存在一些挑战和限制。首先，培养条件的控制需要较高的技术水平和实验操作技能，否则可能会导致感染或污染，影响组织生长。其次，植物组织培养过程中也存在着细胞坏死、突变和不稳定等问题，需要科研人员不断改进培养条件和方法，提高培养效率和成功率。
总的来说，植物组织培养是一项重要的生物技术，为植物科学研究和应用提供了重要手段。随着科技的不断进步，植物组织培养技术也将得到更广泛的应用和发展，为植物育种、生物医药和环境保护等领域带来更多的机遇和挑战。
植物组织培养 篇二
植物组织培养是一种重要的植物生物技术，在植物育种、遗传改良、生物医药和环境保护等领域都有着广泛的应用前景。通过植物组织培养，科研人员可以控制植物的生长和发育过程，实现植物的无性繁殖和遗传改良，为植物生物学研究提供了重要手段。
植物组织培养的成功与否取决于培养基的选择和植物激素的应用。培养基中包含有机和无机营养物质、植物激素、糖和琼脂等成分，可以提供植物细胞生长和分化所需的营养物质和物质基础。植物激素是控制植物细胞分裂、扩散和分化的重要信号分子，不同类型和浓度的植物激素可以促进或抑制细胞的生长和发育。
在实际的植物组织培养中，科研人员需要根据不同植物种类和组织类型选择适合的培养基和植物激素，控制培养条件和操作技巧，以提高培养效率和成功率。通过不断的实验和改进，可以优化培养条件和方法，解决植物组织培养中遇到的各种问题和挑战，进一步推动植物组织培养技术的发展和应用。
总的来说，植物组织培养是一项重要的生物技术，为植物科学研究和应用提供了重要手段。随着科技的不断发展和进步，植物组织培养技术也将不断完善和创新，为植物产业的发展和生态环境的保护带来更多的机遇和挑战。
植物组织培养 篇三
植物组织培养 篇四
植物组织培养 篇五
、自我反思，让自己在今后的学习与生活中也能像做组织培养那样细心、有条理。
二、 实验原理
动物细胞的分化一般是不可逆的，植物则不同。只要具有一个完整的膜系统和一个有生命力的核，即使是已经高度成熟和分化的细胞，也还保持着回复到分生状态的能力。
把已分化组织中不分裂的静止细胞从母体植株上分离下来置于一种能促进细胞增殖的培养基上培养，细胞内就会发生某些变化，例如在休止期间由于溶酶体的破坏活动而丧失了功能的细胞组分又恢复了功能等，从而使细胞进入分生状态。一个成熟转变为分生状态并形成未分化的愈伤组织的现象称作“脱分化”。在组织培养中，把如上述由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体。外植体通常都是多细胞的，并且组成它们的细胞常常包括各种不同的类型，因此由一个外植体所形成的愈伤组织也是异质性的，其中不同的组分细胞具有不同的形成完整植株的能力，即不同的“再分化”能力。
一个植物细胞能产生一个完整植株的固有能力称这为细胞的全能性（Cell
totipotency）。换句话说，细胞全能性是指植物细胞具有全套遗传信息，不管是性细胞还是体细胞，在特定环境下仍能进行表达，而产生一个独立完整的个体。
细胞一旦脱离了母体植株，摆脱了原来所受到的遗传上的控制和生理上的制约，在一定的培养条件下，就会发生一种回复变化，从而失去分化状态，变为分生细胞，实现脱分化过程。然后，这些脱分化细胞经过连续的.有丝分裂，形成愈伤组织，即指在人工培养基上外植体长出来的一团无序生长的薄璧细胞。
脱分化细胞不断进行分裂，从而形成了愈伤组织，愈伤组织在培养基上生长一段时间以后，由于营养物质枯竭，水分散失，以及代谢产物的积累，必须转移到新鲜培养基上培养。这个过程叫做继代。
当试管苗在瓶内长满并长到瓶塞，或培养基利用完时就要转接，进行继代，可迅速得到大量试管苗，以便到一定数量时进行移栽。能否保持试管苗的继代培养，是能否得到大量试管苗和能否用于生产的重要问题。
因此，按培养过程可分为初代培养和继代培养两种类型：
（1）初代培养（Primary culture）：指外植体的最初培养。
（2）继代培养（Subculture）：将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中这种反复多次移植的培养，称为继代培养。
若按照组织培养的材料可分为：（1）组织、器官或细胞培养：指利用生物体各部分组织、器官或细胞进行离体培养，使之形成愈伤组织或完整有机体的技术。
（2）原生质体培养：指将微生物或植物细胞游离成原生质体，在适宜培养条件下，依据细胞全能性使其再生细胞壁，并进行细胞分裂分化，形成完整个体的技术。
植物组织培养 篇六
脱分化
再分化
三、 实验材料和仪器
材料：烟草的叶片， MS培养基所需的各类药品，蔗糖，琼脂，1mol/L的NaOH，
1mg/ml的6—ＢＡ，70%酒精，升汞溶液，无菌水
仪器：电子天平，玻璃棒，大烧杯，移液管，洗耳球，量筒，搪瓷杯，电炉，
ｐＨ计，漏斗，牛皮纸，培养皿，组培瓶，锥形瓶，滤纸，高压蒸汽灭
菌锅，无菌操作台，镊子，解剖刀，酒精灯
四、 实验步骤
（一）配制母液
１.根据书上的相关数据计算配制母液所需药品的用量，和小组其他成员检查核对数据，确定用量。（具体用量见表１）
２.将所需的药品准备好，按照表１的数据进行母液的配制，配制好后写好标签，按顺序摆放好母液。
注意事项：
1.计算配制母液药品用量时要小心仔细，不要出现计算错误。计算完毕后应和小组成员仔细核对，以确保计算无误。
2.在称取药品时一定要看清药品的名称和用量，例如不要将K2HPO4 看成是KH2PO4。
3.配制完母液后要写清标签，切勿弄混。
（二）MS培养基制备
1..在搪瓷杯里加入适量的水，按照表２，依次将溶液加入搪瓷杯中，搅拌。
2..将所得溶液定容到１Ｌ，调ｐＨ值，使ｐＨ＝６.０。
3.称取琼脂条10g，放入搪瓷杯中，放于电炉上加热，待琼脂条完全融化后将其
移开，置于室温下冷却。
4.待其冷却一会儿（不烫手时）后将其分装，总共分装18瓶。用牛皮纸包好瓶
口，扎上棉线。
5.将其和组培瓶、剪刀、镊子、培养皿、滤纸、装有适量水的锥形瓶放入高温灭
菌锅中灭菌。表1
表2
注意事项：
1. 调试pH值要在加热之前，因为温度会影响溶液的pH。
2. 在加热过程中要有人照看，以免溶液因为沸腾而喷洒出来。
3. 在分装时一定要小心，勿将液体培养基倒在瓶口上，如不小心沾上，要小心擦拭干净。
（三）初代培养的接种
1. 将所需用具组培瓶、培养皿、滤纸、镊子、解剖刀、无菌水从灭菌锅取出，准备好75%的酒精，升汞，酒精棉，酒精灯，将它们按一定顺序排好待用。
2..接种前用酒精棉擦手，然后换一块酒精棉擦拭工作台面，再换一块酒精棉擦拭镊子和解剖刀，在等待酒精挥发的同时将锥形瓶的棉线解开，将棉线理好后放在腿上。
3.采集一片长势完好的烟草叶片，用75%酒精浸泡数秒钟，然后用升汞溶液浸泡3min到5min，之后取出，用无菌水漂洗3次。
4.将消毒后的叶片置于无菌滤纸上，用解剖刀将叶片边缘和两端切去，留下主脉及其附近的叶肉，后将剩下的叶片切成1cm2左右大小的外植体。
5.左手拿装有培养基的锥形瓶底部，右手轻轻取下包头纸，将锥形瓶的瓶口靠近酒精灯火焰，瓶口倾斜，。然后用灼烧后冷却的镊子将外植体移入瓶中，叶片背面与培养基接触，轻轻按压使植物能紧贴培养基。镊子使用后放回消毒酒精中，将瓶口在火焰上旋转灼烧数秒钟，后包扎好瓶口，作好标记。
6.定期观察烟草的叶片的生长状况，及时记录并拍照。
注意事项：
1.用酒精棉给手和台面以及镊子和解剖刀消毒时要离酒精灯远一点，待酒精挥发干后才可以靠近酒精灯，避免发生危险。
2.用升汞消毒时要避免消毒时间过长，以免破坏其组织。在消毒过程中要适时晃动一下组培瓶，使叶片与升汞充分接触。
3.切叶片时切忌切的太小。
4.取下的牛皮纸向下摆放，放好叶片再次用牛皮纸包上锥形瓶之前要用火烧一下瓶口，切忌牛皮纸碰到瓶口。
五、 实验结果
第一次观察
第二次观察
六、 实验分析与讨论
通过照片可以看出，此次实验成功地长出了愈伤组织。愈伤组织在培养基上生长一段时间以后，由于营养物质枯竭，水分散失，以及代谢产物的积累，必须转移到新鲜培养基上培养。此次实验由于课时的限制，所以只进行了初代培养。
植物组织培养是看似简单实则是很不容易的一门技术。它要求我们每次做实验都必须要认真、仔细、有条理。不管是哪一次实验，只要其中的一个环节出错，就有可能导致整个实验的失败。所以，认真仔细有条理是做组培的基本条件。
在这次实验中，经过回想与总结，得出了以下的一些经验：
1.大量元素的配制：
首先是要确定药品，不要将药品名称看错。例如不要将K2HPO4 看成是KH2PO4。 这两样东西看起来虽然差不多，其实会对实验产生很大的影响。KH2PO4是酸性的，在此
次实验中和其他药品不会产生沉淀，而K2HPO4是碱性的，在此次实验中会和Mg2+形成
沉淀，影响实验。在配制大量元素无机盐母液时，还要防止在混合各种盐类时产生沉淀，各种药品必须在充分溶解后才能混合，同时在混合时要注意先后次序，把钙离子(Ca2+)、锰离子(Mn2+)、钡离子(Ba2+)和硫酸根离子(SO42-)、磷酸根离子(PO43-)错开，以免KH2PO4和MgSO4与CaCl2等发生作用，相互结合生成硫酸钙、硫酸钡、磷酸钙或磷酸锰沉淀。在混合各种无机盐时，其稀释度要大，慢慢地混合，同时边混合边搅拌。
2.微量元素的配制：
在配制微量元素混合母液时也要注意药品的添加顺序，以免产生沉淀。
3.铁盐的配制：
铁盐必须单独配制，因为与其他母液混合容易产生沉淀，在培养基中，采用螯合铁的形式配制，即硫酸亚铁和Na2-EDTA的混合物，在pH值7.6~8.0时也可保证铁的供应源。
4.母液的保存：配制好的母液应分别贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期。
5.MS培养基配制过程，要注意调试pH是在加热之前，不能加热之后再调pH，因为温度会对其产生影响，会导致pH偏大。在分装的过程中要注意不要将培养基倒在瓶口
上，这样容易受污染。如不小心瓶口沾上，要小心将其擦拭干净。
6.初代培养接种过程，在开始的时候不要急着做实验，要将所有的东西准备好，先在大脑里演示一遍整个实验的过程以及注意事项，确定无误后再开始做实验。实验过程中一定要保持头脑冷静，做到有条不紊。
整个组培的学习过程是有趣的，通过这次的学习，知道了自己的一些不足，在以后的学习生活中，我会一点一点的改正。
